বিশ্ববিদ্যালয়ের পরীক্ষাগারের গোপন অস্ত্র: কিভাবে ফ্রিজ ডাইয়ার্স ১০ বছর ধরে বৈজ্ঞানিক নমুনাগুলি 'সময়ের মধ্যে ফ্রিজড' রাখে?

ফ্রিজ-ডাইংয়ের পেছনে বিজ্ঞান: নমুনা রক্ষা করা ছাড়াই সম্পূর্ণ হওয়া

সাবলিমেশন: ফ্রিজ ডাইয়ারের মৌলিক মেকানিজম

ফ্রিজ-ডাইং সাবলিমেশনের চারপাশে তৈরি, যেখানে বরফ প্রথমে তরল হওয়ার আগেই বাষ্প হয়ে যায়। এই ধাপটি ফ্রিজ-ডাইং-এর জন্য কৃত্রিম এবং সাধারণত বিশেষ শর্তাবলী—অর্থাৎ নিম্ন তাপমাত্রা এবং ভ্যাকুমের প্রয়োজন হয়। ফার্মাসিউটিকাল সায়েনসেস জার্নালে প্রকাশিত গবেষণা প্রতিবেদন অনুযায়ী, ভ্যাকুম ফ্রিজ ডাইয়ার ব্যবহার করে সাবলিমেশন কোষের গঠন এবং জৈব অণুগুলিকে অক্ষত রাখে এবং কোনো ক্ষতি ঘটায় না। সংরক্ষণের প্রভাবটি শুধুমাত্র তত্ত্বগত নয়, বরং বিভিন্ন অধ্যয়নে দেখানো হয়েছে যে এটি ফ্রিজিং-সেনসিটিভ উপাদানের সংরক্ষণের প্রক্রিয়ার মাধ্যমে অক্ষত থাকার জন্য প্রয়োজনীয়।

ভ্যাকুম প্রযুক্তি: গঠনগত সম্পূর্ণতা রক্ষা

ফ্রিজ-ডাইয়ার এ ভ্যাকুম ব্যবহার করা প্রয়োজন চাপ কমাতে, উপস্থিতি সম্ভব করতে এবং নমুনার মৌলিক গঠন সংরক্ষণ করতে। এই পদ্ধতি বিশেষভাবে গুরুত্বপূর্ণ হল সংবেদনশীল জৈব নমুনার জন্য, যা সख্ত শর্তাবলী ছাড়া মারা যেতে পারে। ভ্যাকুম প্রযুক্তির দাবি আছে যে এটি প্রয়োজনীয় হল সংরক্ষিত নমুনার অখণ্ডতা রক্ষা করতে, কারণ এটি গঠনের ভাঙনা এবং জৈব রসায়ন প্রক্রিয়ার ক্ষতি বন্ধ রাখে। বিজ্ঞানের জন্য, ভ্যাকুম প্রযুক্তি হয়ে উঠেছে বিজ্ঞানের বিভিন্ন ক্ষেত্রে প্রয়োজনীয় বিষয় - ফার্মা থেকে জীববিজ্ঞান থেকে জৈবপ্রযুক্তি; গঠন অপরিবর্তিত রাখা সংরক্ষণের একটি কেন্দ্রীয় ধারণা।

তাপমাত্রা নিয়ন্ত্রণ: কোশীয় ক্ষতি রোধ করা

তাপমাত্রা সংযোজন হল ফ্রিজ-ডাইং প্রক্রিয়ার মধ্যে ব্যাটি নমুনাগুলি সুরক্ষিত রাখার জন্য মৌলিক অপারেশন। কারণ মাইক্রোসেন্ট্রিফিউগ এছাড়াও জৈব অণুগুলির সংরক্ষণের জন্য ডিজাইন করা হয়, সঠিক তাপমাত্রা রেঞ্জ বজায় রাখা আবশ্যক। জীববিজ্ঞান শিক্ষার জার্নালে প্রকাশিত একটি গবেষণায় দেখানো হয়েছে যে তাপমাত্রা নিয়ন্ত্রণের মাত্রা সংরক্ষণের ফলাফলের উপর সরাসরি প্রভাব ফেলে, যা জৈব উপাদানের কার্যক্ষমতা সংরক্ষণ করে। এই উচ্চ মাত্রার নিয়ন্ত্রণটি অত্যাবশ্যক যদি কোষের ক্ষতি এড়ানো যায়, এবং ভবিষ্যতের গবেষণা বা ব্যবহারের জন্য ব্যবহৃত নমুনাগুলির পূর্ণতা এবং জীবন্ততা সংরক্ষণ করা হয়। চালাক তাপমাত্রা নিয়ন্ত্রণ ফ্রিজ-ডাইংকে প্রতিটি ল্যাবের জন্য উপযোগী করে তোলে এবং অপ্রত্যাশিতভাবে দ্রুত শুকনো পণ্যের উচ্চ গুণবত্তা গ্যারান্টি করে, এভাবে ল্যাব পরিবেশের সকল দাবি পূরণ করে এবং একই সাথে পণ্য সংরক্ষণের জন্য।

কেন বিশ্ববিদ্যালয়ের ল্যাবগুলি দশক-দীর্ঘ সংরক্ষণের জন্য ফ্রিজ ডাইয়ার ওপর নির্ভর করে

কেস স্টাডি: ডিএনএ, টিশু এবং ঔষধ স্থিতিশীলতা

বিশ্ববিদ্যালয়ের পরীক্ষাগারটি কাজের একটি দীর্ঘ ধারার অংশ, যা ফ্রিজ-ডাইং-এর মাধ্যমে DNA, টিশু এবং ওষুধের যৌগের মতো সংকটজনক নমুনাগুলি রক্ষণাবেক্ষণের মূল্য প্রদর্শন করে। কেস স্টাডিগুলি দেখায় যে ফ্রিজ-ডাইং এই নমুনাগুলির মেয়াদ বাড়ায় এবং তাদেরকে দীর্ঘ সময়ের জন্য স্থিতিশীল এবং কার্যক্ষ রাখে। উদাহরণস্বরূপ, কিছু গবেষণার পরিসংখ্যান দেখায় যে দশ বছর পর ফ্রিজ-ডাইড ডিএনএর ভাঙ্গনের হার ঐতিহ্যবাহী পদ্ধতিতে আর্কাইভ করা নমুনার তুলনায় অনেক কম। বিজ্ঞানীরা অনেক সময় ফ্রিজ ডাইয়ারের রক্ষণাবেক্ষণ শক্তির প্রতি সaksiত্ব জানান, যা ফ্রিজ ডাইয়ার নমুনার মৌলিক গঠনকে পূর্ণতায় রক্ষা করতে পারে, তাই ফ্রিজ ডাইং এটি দশকের জন্য রাখতে পারে এবং নমুনাটিকে মূলত এর আদি আকারে রাখতে পারে, যাতে এটি বছরের গবেষণা প্রকল্পের জন্য নির্ভরযোগ্য পরীক্ষা তথ্য প্রদান করতে পারে।

আর্থিক ফ্রিজ ডাইয়ার্স বনাম পরীক্ষাগার মাত্রার মডেল

এন্ডাস্ট্রিয়াল এবং ল্যাবরেটরি-স্কেলের ফ্রিজ ডাইয়ার ভিন্ন প্রয়োজন মেটাতে এবং তাদের যথাযথ উপকারিতা প্রদান করতে ব্যবহৃত হয়। এন্ডাস্ট্রিয়াল ফ্রিজ ডাইয়ার সাধারণত বড়, খরচযুক্ত এবং উচ্চ উৎপাদন লাইনের জন্য ব্যবহৃত হয়, যা শুধুমাত্র বড় মাত্রার উৎপাদনের জন্য প্রয়োগ করা যায়। অন্যদিকে, ল্যাব-স্কেলের মডেল কম খরচের এবং অনেক কম জায়গা ঘেঁটে থাকে, তাই এগুলি বাজেট-সীমাবদ্ধ বা জায়গা-সীমাবদ্ধ উদ্দেশ্যের জন্য উপযুক্ত। শিল্প বিশেষজ্ঞদের মতে, এই মডেলগুলির মধ্যে বাছাই সাধারণত বিশেষ কার্যাত্মক প্রয়োজনের উপর নির্ভর করে, এবং ল্যাবের সম্পন্ন করতে হবে তার দক্ষতা লক্ষ্য। প্রতিষ্ঠানিক ল্যাবগুলি বাজেটারি এবং কার্যাত্মক সীমাবদ্ধতার মধ্যে কাজ করতে ছোট মডেল কিনতে পারে।

ফ্রিজ-ডাইং রিফ্রিজারেশনকে কিভাবে বেশি ভালোভাবে কাজ করে

ফ্রিজ-ডাইং প্রযুক্তি নিয়মিত শীতলনের তুলনায় নমুনা সংরক্ষণের বিভিন্ন দিকে, মান এবং সংরক্ষণের সময়ের বিষয়ে, কিছু সুবিধা রয়েছে। গবেষকরা দেখান যে উদ্ভিদের নমুনা তাদের জীবন্ত প্রতিশতের তুলনায় কম নষ্ট হয় এবং আরও বেশি ক্যানসার বিরোধী ক্ষমতা রাখে। পরিসংখ্যানগত ডেটা দেখায় যে ফ্রিজ ডাইংযুক্ত নমুনাগুলির কম দূষণ থাকে, যা তাদের জীবন্ত অবস্থা বজায় রাখতে লম্বা সময় পর্যন্ত সংরক্ষণের জন্য খুবই গুরুত্বপূর্ণ। সংবেদনশীল জৈব বা ঔষধি নমুনা সংরক্ষণের ক্ষেত্রে ফ্রিজ-ডাইং শীতলনের তুলনায় বেশি পছন্দ হয়, যা উত্তম সংরক্ষণ কার্যকারিতা তৈরি করে এবং চলমান গবেষণা প্রচেষ্টায় ধনাত্মক ফলাফল নিশ্চিত করে।

ফ্রিজ ডাইয়ার্স বিয়োর ট্রেডিশনাল প্রসংগ পদ্ধতি

পুষ্টি বজায় রাখা: ফ্রিজ-ডাইং বিয়োর হিট-ভিত্তিক শুকনো

ফ্রিজ-ডাইং তাপমুখী শুকনোর চেয়ে বায়োলজিক উপাদানের পুষ্টি ধারণের বিষয়ে আগে থাকে, কারণ তাপজনিত শুকনোর ক্ষেত্রে পুষ্টি ভেঙ্গে যেতে পারে। তাপ শুকানোর সময় ব্যবহৃত উচ্চ তাপমাত্রা তাপ-সংবেদনশীল পুষ্টি ধ্বংস করতে পারে, অন্যদিকে ফ্রিজ-ডাইং কম তাপমাত্রায় উপস্থিতির মাধ্যমে কাজ করে। এই প্রক্রিয়া নমুনার পুষ্টি পূর্ণতা রক্ষা করে, যা বিজ্ঞানীদের গবেষণা ও বিশ্লেষণের জন্য গুরুত্বপূর্ণ। উদাহরণস্বরূপ, ফ্রিজ-ডাইড ফলে ৯৭% ভিটামিন সংরক্ষণ করতে পারে যখন সাধারণ তাপমুখী শুকনো ফলে শুধুমাত্র ৫০% ভিটামিন থাকে। আমেরিকান সোসাইটি ফর নিউট্রিশন এর মতে বৈজ্ঞানিক গবেষণার জন্য পুষ্টি পূর্ণতা রক্ষা করা প্রয়োজন, এটি তুলে ধরেছে যে কেন ফ্রিজ-ডাইং পদ্ধতি নির্বাচন করা উচিত সাধারণ তাপমুখী শুকানোর চেয়ে।

১০+ বছরের জন্য সংরক্ষণের মাধ্যমে লাগত কার্যকর

৫ বছরের খরচের তুলনা মূল্যায়ন করার সময় ফ্রিজ-ডাইং প্রক্রিয়ার সূত্রগুলি ঐকই পরিমাণের সূত্রগুলির সাথে ঐকিক প্রক্রিয়ার তুলনায় একটি বড় খরচ বাঁচানো হয়। যদিও শুরুতে বেশি খরচ হতে পারে, ফ্রিজ ডাইয়ার্স সময়ের সাথে অপচয় এবং নমুনা হারিয়ে যাওয়ার হার কমায় এবং সুতরাং অর্থনৈতিক উপকারিতা উপস্থাপন করে। শিল্প প্রকাশনাগুলি ফ্রিজ ডাইয়ার্স এবং স্প্রে ডাইয়ার্সের মধ্যে সকল খরচের মালিকানা খরচের ভিত্তিতে তুলনা করে - নতুন, চালানো এবং সজ্জা রক্ষণাবেক্ষণের স্বার্থে সজ্জা চালানো – এবং তাদের খরচের উপযুক্ততা আরও বেশি হয় কম নষ্ট হওয়ার এবং কম পরিমাণে নমুনা প্রতিস্থাপনের কারণে। ল্যাবগুলি একটি নির্দিষ্ট সময়ের মধ্যে নমুনা জন্য ৪০% বা তারও বেশি খরচ বাঁচানোর প্রতি রিপোর্ট করছে, যা এই প্রযুক্তিতে মানবিক যুক্তির জন্য আরও বিশ্বাসযোগ্য হিসাবে অবদান রাখে।

সংবেদনশীল নমুনায় দূষণের ঝুঁকি কমানো

ফ্রিজ-ডাইং জটিল বৈজ্ঞানিক নমুনাগুলির সাথে কাজ করার সময় দূষণের ঝুঁকি হ্রাস করতে অত্যন্ত কার্যকর, এটি শীতাতপ পদ্ধতির তুলনায় বেশি কার্যকর, কারণ শীতাতপ একটি নম প্রক্রিয়া। ফ্রিজ ডাইং পদক্ষেপে জলবায়ুর অভাবের কারণে মাইক্রোবগুলি বৃদ্ধি পাওয়ার থেকে বাচে। পূর্ববর্তী গবেষণায় দেখানো হয়েছে যে শীতাতপিত নমুনাগুলিতে দূষণের ঘটনার সংখ্যা ফ্রিজ-ডাইড নমুনার তুলনায় অনেক বেশি (১)। ফ্রিজ ডাইং ডিজাইন করার সময় উত্তম অস্টিক শর্তগুলি প্রদান করা হয়, যাতে পণ্যের জন্য সর্বোচ্চ শোধ উৎপাদিত হয়, একটি শক্তিশালী ভ্যাকুয়াম এবং ঠিক তাপমাত্রা নিয়ন্ত্রণ করা হয়। এগুলি নমুনার গঠনকে ধ্বংস বা পরিবর্তন হতে বারণ করে -এবং চূড়ান্তভাবে নমুনার পূর্ণতা নিশ্চিত করে। গবেষণা ল্যাব এবং উৎপাদনের পরিবেশে ফ্রিজ ডাইয়ার্স একটি অপরিহার্য যন্ত্র, যেখানে সংবেদনশীল উপাদানগুলি শুকানো আবশ্যক।

অগ্রগামী বৈজ্ঞানিক গবেষণায় প্রয়োগ

সুন্দর জীববিজ্ঞানীক নমুনার ক্রায়োপ্রের্ভেশন

ফ্রিজ-ডাই প্রক্রিয়াটি অসাধারণ জৈব নমুনাগুলির সংরক্ষণে কৃত্রিমভাবে গুরুত্বপূর্ণ, যা ভবিষ্যতে ব্যবহার করা যেতে পারে। এই প্রক্রিয়ায় নমুনাগুলি দ্রুত ফ্রিজ হয়, এবং ব্যাকুম উত্তপ্তি এবং আদশনের মাধ্যমে জল বাদ দিয়ে নেওয়া হয় যা ম্যাট্রিক্স স্ট্রাকচারকে ধ্বংস করে না। একটি প্রখ্যাত উদাহরণ হল (স্মিথসোনিয়ান) প্রোগ্রাম, যা হুমকম্পিত জীবজন্তু প্রজাতির প্রজননশীল কোষগুলি ক্রায়োসংরক্ষণের জন্য ফ্রিজ ডাই ব্যবহার করে। এই পদ্ধতিগুলি আন্তর্জাতিক জীবজন্তু সংগঠনসমূহের সাথে সংযোগে বিশেষ অগ্রগতি করেছে বৈচিত্র্যের সংরক্ষণের জন্য। লাইওফিলাইজেশনের মাধ্যমে গবেষকরা পরিবেশ এবং পুনরুদ্ধার গবেষণার জন্য মূল্যবান জৈব নমুনাগুলির সংরক্ষিত অবস্থা বজায় রাখতে পারেন।

ব্যাকসিন স্থিতিশীল করে বিশ্বব্যাপী বিতরণ

ফার্মাসিউটিক্যাল শিল্পে, ভ্যাকসিনগুলি স্থিতিশীল করতে সাধারণত হিমায়িত-শোষণ ব্যবহার করা হয়, যা তারপর বিশ্বের প্রায় যে কোনও জায়গায় পাঠানো যেতে পারে। এই পদ্ধতিটি টিকাগুলির জীবনকালকে তাপীয় অবক্ষয়ের প্রতিরোধী করে তোলে এবং তাদের ঘরের তাপমাত্রায় দীর্ঘ সময়ের জন্য সংরক্ষণের অনুমতি দিয়ে শিপিংয়ের ব্যয় হ্রাস করে। প্যাকেজের পিছনের অনুমানগুলি ইঙ্গিত দেয় যে এই ধরনের ফ্রিজ-শুকনো ভ্যাকসিনগুলি প্রচলিত রেফ্রিজারেটেড ভ্যাকসিনগুলির তুলনায় পরিবহন এবং সঞ্চয়স্থানের খরচ প্রায় 30% হ্রাস করতে পারে। ফ্রিজ-শুকনো করার সমর্থনেও সাহিত্য রয়েছে, যেমন জার্নাল অফ ফার্মাসিউটিক্যাল সায়েন্সেসের একটি গবেষণা যা দীর্ঘ সময়ের জন্য স্থিতিশীল থাকা মরিস ভ্যাকসিনের ফ্রিজ-শুকনো সংস্করণ পরীক্ষা করে। এটি বিশ্বব্যাপী স্বাস্থ্য প্রচেষ্টায় কেন্দ্রীয় হিমায়ন-শোষণের ব্যবহার করে ভ্যাকসিনের জন্য শীতল সঞ্চয়স্থানে দুর্বল অ্যাক্সেস রয়েছে এমন অঞ্চলে ভ্যাকসিন বিতরণকে আরও সমর্থন করে।

পুরাতত্ত্ব সংক্রান্ত প্রাচীন বস্তু পুনরুজ্জীবনের পদ্ধতি

ফ্রিজডাইং: শীর্ষস্ত বর্তমান প্রযুক্তি যখন প্রাচীনতত্ত্ব উপকরণ সংরক্ষণ এবং পুনরুদ্ধারের কথা আসে, তখন ফ্রিজডাইং-এর চেয়ে উচ্চতর প্রযুক্তি পাওয়া যায় না। এই প্রক্রিয়াটি সংবেদনশীল উপকরণ রক্ষা করতে আদর্শ, কারণ এটি ধীরে ধীরে ভেতরের জল বাদ দেয়, অ sudden decomposition-এর ক্ষতিকারক প্রভাব ছাড়া। ব্রিটিশ মিউজিয়ামের সংরক্ষকদের পরামর্শ অনুযায়ী, ফ্রিজডাইং জলপ্লাবিত প্রাচীনতত্ত্ব স্থান থেকে খননকৃত বস্ত্রের ঐতিহাসিক গঠন সংরক্ষণের জন্য আদর্শ। ভাইকিং যুগের কাঠের বস্তু যা ফ্রিজডাইং পদ্ধতিতে সংরক্ষিত হয়েছিল এবং বিস্তারিত বিশ্লেষণ এবং প্রদর্শনের জন্য সংরক্ষিত হয়েছিল, তা একটি উল্লেখযোগ্য সফল সংরক্ষণের গল্প। এই ধরনের অ্যাপ্লিকেশনগুলি ফ্রিজডাইং-এর সংস্কৃতি ও ঐতিহাসিক ধেরের বিভিন্ন সময়কালের জন্য সংরক্ষণের অনন্য অবদান তুলে ধরে, যেন এটি বিভিন্ন সংস্কৃতি ও ঐতিহাসিক যুগের জন্য স্থায়ী সুরক্ষা নিশ্চিত করে।

দীর্ঘমেয়াদী সংরক্ষণের জন্য ফ্রিজ ডাইয়ারের দক্ষতা গুরুত্বপূর্ণ করা

শূন্য চাপ সেটিংস অপটিমাইজ করা

কিছু আদর্শ অনুযায়ী, একটি ফ্রিজ ডাইং সিস্টেমের উৎপাদনশীলতা এবং কার্যকারিতা বাড়ানোর জন্য ভ্যাকুম চাপ সেটিংস নিয়ন্ত্রণ করা প্রয়োজন। যদি সঠিক ভ্যাকুম থাকে, তবে আপনি চাপ নির্দেশনা মেনে ফ্রিজ ডাইয়ারের চাপকে অপটিমাল স্তরে পরিবর্তন করে নমুনাগুলি থেকে জল বাদ দিতে পারেন এবং সফলভাবে সংরক্ষণ করতে পারেন। তথ্য প্রযুক্তি রিপোর্ট নির্দেশ করে যে নমুনা ধরন এবং তাদের নির্দিষ্ট জীবন কাল অনুযায়ী চাপ সেটিংস পরিবর্তন করা প্রয়োজন। উদাহরণস্বরূপ, সময়ের সাথে ওষুধ সংরক্ষণের জন্য প্রয়োজনীয় সেটিংস বায়োলজিক্যাল নমুনা সংরক্ষণের প্রয়োজনীয় সেটিংস থেকে ভিন্ন হতে পারে। এই রিপোর্টগুলি থেকে সংগ্রহিত তথ্য দেখায় যে সঠিক ভ্যাকুম চাপ নিয়ন্ত্রণ এবং সফল সংরক্ষণের মধ্যে সরাসরি সম্পর্ক রয়েছে; যাতে সংরক্ষিত হওয়ার পরেও দীর্ঘ সময় ব্যাপি জীবন্ত থাকার সম্ভাবনা থাকে।

10+ বছরের জন্য নির্ভরশীলতা নিশ্চিত করতে নিয়মিত রক্ষণাবেক্ষণ

একটি ফ্রিজ ডায়ারে ১০+ বছর সম্পূর্ণ জীবন রক্ষা করতে নিয়মিত রক্ষণাবেক্ষণের প্রয়োজন। সিল, ভ্যাকুম পূর্ণতা ইত্যাদি আইটেমের নিয়মিত পরীক্ষা এবং রক্ষণাবেক্ষণ অপারেশনের ব্যারাবার এবং উত্তম পারফরম্যান্স রক্ষা করতে প্রয়োজনীয়। নিয়মিত রক্ষণাবেক্ষণের মধ্যে থাকবে: * গ্যাস্কেটের রিলিক পরীক্ষা * রেফ্রিজারেশন ইনস্টলেশনের কাজের যোগ্যতা যাচাই * নিয়মিতভাবে কন্ট্রোল সেটিংস পুনঃপরীক্ষা। শীর্ষ কোম্পানিগুলি এবং ক্ষেত্র থেকে সেরা প্রথা পরামর্শ দেয় যে পরীক্ষা এবং যাচাই অর্ধবার্ষিকভাবে এবং জয়িকালি যথাক্রমে করা উচিত। এই পরিচালনা নির্দেশিকা অনুসরণ করে প্ল্যান্টগুলি অসীমকাল পর্যন্ত চলতে থাকে।

নমুনা প্রস্তুতি এবং লোডিং-এর জন্য সেরা অনুশীলন

সাম플 প্রস্তুতকরণ এবং লোডিংয়ের উপর নির্ভর করে ফ্রিজ ডাইংয়ের সর্বোচ্চ সংরক্ষণ এবং দক্ষতা অর্জনে। ফ্রিজ-ডাইংয়ের কার্যকারিতা একটি সামপলের আকার, আকৃতি এবং জল পরিমাণের উপর নির্ভর করে। সেরা ফলাফল পেতে আপনি নিশ্চিত করতে চাইবেন যে সামপলগুলি আকার এবং মোটা হিসাবে একই হয়, যাতে সমানভাবে শুকানো যায়। লোড করার আগে জলের পরিমাণ কম করা উচিত যদি প্রিফ্রিজ পদ্ধতি উপলব্ধ না থাকে। এই পদক্ষেপগুলি শিল্প স্টেকহোল্ডারদের দ্বারা পর্যালোচিত ব্যবহারিক সাহিত্যের ভিত্তিতে ফ্রিজ ডাইংয়ের দক্ষতা বাড়ানোর জন্য এবং সেলুলোজ সামপলের জন্য অপ্টিমাল সংরক্ষণ এবং পুনর্গঠনের শর্তগুলি প্রদান করতে পরামর্শ দেওয়া হয়েছে।